原理:
索氏提取法的原理是將樣品置于索氏脂肪抽提器中,反復(fù)經(jīng)乙MI(或石油醚)抽提,使脂肪溶解于溶劑中,然后加熱除去溶劑,稱重,即可算出樣品中粗脂肪百分含量。由于樣品中類脂物質(zhì)亦溶解于此溶劑中,故稱粗脂肪含量,也是國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)推薦法,仲裁時(shí)以此油重法為準(zhǔn)。本法所得結(jié)果準(zhǔn)確、穩(wěn)定,其缺點(diǎn)是費(fèi)時(shí),一般須10小時(shí)以上,而且一套儀器只能測(cè)定一個(gè)樣品,不適于大批樣品的分析。
主要儀器:
(1)分析天平:感量0.0001g
(2)粉碎機(jī)、研缽、切片機(jī)
(3)電熱式恒溫水浴:6或8孔式)。
(4)烘箱。
(5)濾紙筒:直徑22mm,長(zhǎng)100mm。
(6)裝有變色硅膠的干燥器。
試劑:
無水乙MI:化學(xué)純。
操作步驟:
(1)樣品的選取和制備:選取有代表性的油料種子,揀出雜質(zhì),按四分法縮減取樣。小粒種子,如芝麻、油菜等,取樣量不得少于25g;大粒種子如大豆、花生仁等,取樣量不得少于30g。大豆經(jīng)105±2℃烘干1小時(shí)后取出,放入干燥器內(nèi)冷卻至室溫。粉碎,并通過40目篩;花生仁切碎。帶殼油料種子,如花生果,蓖麻籽,向日葵籽等,需將殼與籽粒分開,分別稱量,計(jì)算出仁率。然后測(cè)定籽粒的油分。制備完畢,立即混合均勻,裝入磨口瓶中備用。
(2)研磨與稱樣:稱取備用樣品2-4g兩份,(含油0.7-1.0g),準(zhǔn)確至0.001g。置105±2℃烘箱中干燥1小時(shí),取出,放入干燥器內(nèi)冷卻至室溫。同時(shí)測(cè)試樣的水分。將試樣在研缽內(nèi)研細(xì),將研細(xì)的試樣移入已干燥的濾紙筒,取少量脫脂棉蘸乙MI擦凈研缽、研桿和牛角勺上的樣品和油跡,一并投入濾紙筒內(nèi)(大豆已預(yù)先烘干粉碎可直接稱樣裝筒),在試樣面層塞以脫脂棉,以防樣品損失,將濾紙筒投入抽提管內(nèi)。每個(gè)抽提器只放一個(gè)單樣。
(3) 在裝有2--3粒沸石并已烘至恒重的潔凈的抽提瓶?jī)?nèi),加入約瓶體積1/2的無水乙MI,把抽提器各部分連接起來,連接好冷凝水流,調(diào)節(jié)水浴溫度,使冷凝下滴的乙MI速度180滴/分(水浴溫度約在55℃以下)谷物、大豆樣品抽提8小時(shí),一般油料抽提10小時(shí),有些含油量很高的油料種子,應(yīng)延長(zhǎng)抽提時(shí)間,直到抽提管內(nèi)的乙MI用濾紙?jiān)囼?yàn)無油跡時(shí)為止。
(4)抽提完畢后,從抽提管中取出濾紙筒,再連接好抽提器,在水浴上蒸餾回收抽取瓶中的乙MI。然后取出抽提瓶,在沸水浴上蒸去殘余的乙MI。
(5)將盛有粗脂肪的抽提瓶放入105±2℃烘箱中烘干1小時(shí),放入干燥器中冷卻至室溫(約 45-60分鐘)后稱重,準(zhǔn)確至0.0001g,再烘30分鐘,冷卻、稱重,直至恒重。抽提瓶增加的重量即為粗脂肪的重量。抽出的油應(yīng)是清亮的,否則應(yīng)重做。